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MemoBio©
- Muqueuses et lésions suintantes : prélèvement avec un écouvillon stérile humidifié
- Lésions squameuses : gratter par un vaccinostyle
- Ongles : racler sous le bourrelet du péri-onyxis
- Liquides pathogènes et biopsies : acheminer dans un flacon stérile sans milieu de transport particulier.
Il doit être réalisé assez rapidement après le prélèvement (les levures proliférent à température ambiante)
- Eclaircissement : réalisé avec de la potasse (KOH) : uniquement pour les squames et les ongles
- Coloration : l’observation au microscope se fait soit directement à l’état frais entre lame et lamelle soit après coloration : bleu lactique, gram, MGG, bleu de méthylène, Gomori-Grocott …
- Observations : les levures peuvent apparaître sous forme de blastospore (forme ovale de 2-4µm +/- bourgeonnement), de pseudomycélium ou de mycélium
- Milieu de Sabouraud + antibiotique (gentamicine, chloramphénicol pour inhiber les contaminations bactériennes).
Candida albicans pousse sur milieu Sabouraud chloramphénicol actidione (mais d’autres espèces de Candida sont inhibées par l’actidione).
- Milieu chromogène : permet d’identifier C. albicans directement à la couleur de la colonie (pour les autres levures, des examens complémentaires sont nécessaires pour identifier l’espèce en cause)
- Milieu pauvre : RAT, PCB (pomme de terre, carotte, bile) : permettent d’observer les formes pseudomycélium
Incubation à 25-30°C (éventuellement 37°C pour les prélèvements profonds)
C. albicans : développement en 24-48H de colonies d’1-2mm de diamètre, crémeuses, blanchâtre
- Test de blastèse : étude de la filamentation
- Recherche de chlamydospores
- Détection antigènique : technique d’agglutination (particules de latex sensibilisée par de anticorps monoclonaux
Utilisé pour le diagnostic ou la surveillance des candidoses profondes.
- détection des Ac : il faut tenir compte du titre, des arcs de précipitation …
- détection des Ag circulants : détection d’Ag mannanes (peu être intéressant chez l’immunodéprimé où la détection d’Ac peut être difficile d’interprétation)
Un antifongigramme peut être réalisé dans le cadre d'un échec thérapeutique.
Des CMI peuvent être mesurées par la technique des E-test